TC-100培養基是一種常用的昆蟲細胞培養基(如用于果蠅S2細胞、草地貪夜蛾Sf9/Sf21細胞等),主要用于貼壁或懸浮培養昆蟲細胞,支持重組蛋白表達或病毒擴增(如桿狀病毒系統)。
TC-100培養基的優點:
1.針對性強:專門設計用于昆蟲細胞培養,尤其是鱗翅目昆蟲細胞系,如Sf9細胞、家蠶細胞等,對這些細胞的生長和繁殖具有良好的支持作用,能夠滿足昆蟲細胞特殊的營養需求和生長環境要求。
2.優化病毒生產:通過對成分的改良,省略了一些不必要的物質,更加有利于桿狀病毒毒粒的生產,提高了病毒的產量和質量,為昆蟲細胞表達系統中重組蛋白的高效表達提供了有力保障,廣泛應用于生物制藥領域,如病毒疫苗、抗體藥物的研發和生產。
3.成分明確:作為一種合成培養基,其成分明確且可控,不含動物血清或其他不明確的生物制品,減少了因血清帶來的污染風險,如病毒、支原體等污染物的潛在威脅,同時也避免了血清批次間的差異對實驗結果的影響,提高了實驗的重復性和可靠性。
4.使用方便:以液體形式供應,無需現場配制,節省了時間和精力,并且減少了配制過程中可能引入的誤差和污染機會。同時,嚴格的質量控制和標準化生產流程確保了每批產品的質量一致性,方便用戶直接使用。
5.穩定性好:在適當的儲存條件下(2-8℃冷藏并避光),保質期可達9個月左右,保證了培養基在較長時間內的穩定性和有效性,降低了因培養基變質而導致細胞生長異常的風險,也減少了頻繁更換培養基的成本和工作量。
6.可擴展性好:適用于不同規模的昆蟲細胞培養,無論是小規模的實驗室研究還是大規模的工業化生產,都可以通過調整培養體積和培養條件來滿足需求,具有良好的可擴展性和靈活性。
TC-100培養基進行細胞培養時的注意事項:
-預熱:使用前將培養基調至27℃(昆蟲細胞最適溫度),避免低溫刺激細胞。
-換液頻率:貼壁細胞待培養基變黃(pH下降)時換液(約每3~4天一次);懸浮細胞根據密度調整(密度>5×10cells/mL時需離心換液)。
-傳代控制:細胞密度不超過1×10cells/mL(過高導致營養耗竭),貼壁細胞用胰酶(0.25EDTA)消化時控制時間(避免損傷)。
-無菌操作:所有操作在生物安全柜中進行,移液器、槍頭嚴格消毒,避免交叉污染。
-定期檢測:長期培養的細胞需定期取樣鏡檢(觀察是否有支原體污染,可用DNA熒光染色法或PCR檢測)。
-重組蛋白表達:若用于桿狀病毒系統,感染后需降低培養溫度(如從27℃降至25℃)以延緩細胞裂解,延長蛋白分泌時間。
-懸浮培養優化:對于適應懸浮的細胞(如Sf9),需調整攪拌速度(<150rpm)避免剪切力損傷,并監測溶氧(DO≥30)。